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本生教您如何辨別胎牛血清,胎牛血清使用方法
影響胎牛血清質(zhì)量的因素主要有:血源、內(nèi)毒素、總蛋白含量、血紅蛋白、pH、微生物、免疫球蛋白等等,那么如何簡易快速的辨別血清質(zhì)量的好壞呢?拿到血清,最先接觸的是血清外觀,外觀的判斷尤為重要,可以讓我們粗略的快速辨別血清質(zhì)量的好壞。BUNSEN本生主要從以下幾個方面:
1、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chǎn)血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進口的血清,質(zhì)量好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,如Gibco 16000,差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
2、沉淀
很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈",很少有沉淀產(chǎn)生。
進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當(dāng)然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。
當(dāng)然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程最好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3、澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。
胎牛血清使用前的保存:
血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
胎牛血清與新生牛(小牛)血清組份與比例不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
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